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大鼠成骨细胞培养全攻略，从传代到冷冻细胞传代培养：接到细胞后，首先要对细胞培养瓶表面进行清洁，然后将细胞放置在恒温培养箱内进行1-2小时的缓存，待细胞修复并恢复生长状态后，再进行后续细胞试验。在倒置显微镜下观察细胞的生长情况：如果细胞未长到85%，用75%乙醇喷洒消毒处理，然后放进微生物工作台内，严格遵循无菌操作原则。打开细胞培养瓶，若培养瓶上没有特殊标明，吸掉剩余的细胞培养液，只留下6-8ml细胞培养液继续培养。如果细胞已爬满（达85-95%），就可以进行传代培养，具体方法如下：弃掉细胞培养液，用PBS清洗1-2次；添加1.0ml胰蛋白酶消化酶，37℃消化（消化时间根据不同细胞和常用的胰蛋白酶略有不同），通过高倍显微镜观察细胞消化情况。如果细胞收缩变圆、通透、轻轻拍打瓶壁呈流砂样掉落，则迅速取回工作台，添加至少翻倍的完全细胞培养液，停止消化并轻轻吹打细胞1-2次，使之变为单细胞悬浮液；将细胞收集于离心管中离心式1000rmp/5min，弃上清，保留底层细胞，将细胞弹散；添加新鲜的培养液重悬细胞，进行传代培养；如果没有特别提示，建议第一次传代培养的比例是1:2。注意事项：观察细胞密度时使用（4X目镜）低倍镜，便于准确判断；观察细胞形状时使用（10X或20X）高倍镜。使用0.05%胰蛋白酶/EDTA消化酶。瓶内运输细胞培养液不能重复使用，请换新鲜的细胞培养液塑造。有些细胞贴壁不稳固，若发现贴壁细胞有掉落，可离心式重悬后注射到原瓶里。细胞冷冻保存：常规方法收集对数期的贴壁细胞或悬浮细胞于试管中。根据塑造细胞的密度确定需要冷冻保存的细胞数。将需要数量的细胞混液放置离心管中，1000rmp，5min离心式收集塑造细胞沉积，弃上层清液。加入适量细胞冻存液于离心管中，使细胞浓度约为5×105-1×107/ml。轻轻搅拌细胞，制成细胞混合物。将离心管中的细胞混合物分开包装于已标识的冻存管中，建议每管1ml或1.5ml。直接把分装好的细胞冻存管放进-80℃医用冷藏箱中，可长期冷冻。如果要液态氮中远期储存，需先放入-80℃冰箱至少一天时间，再移到液氮罐中保存。以上冷冻保存步骤是按照无血清蛋白冻存液进行的。慈喀SEO百科客服微信:seo5951(有不明白的咨询他)

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UBC选课攻略：Workday选课技巧 1️⃣ 提前做好两个学期的课程安排，多做几个安排也没关系。 2️⃣ 确认自己的学分是否已经转换，转换了就不需要再选那门课了。 3️⃣ 选修课因人而异，没有真正轻松的送分课。要么需要你认真背诵，要么课程竞争激烈，要么作业繁多。 4️⃣ 在你感兴趣的范围内，参考UBCgrades上均分85+的课程作为选修课的选择，这样最合适。 5️⃣ 如果你对天文、气象、地理、海洋、小恐龙、小宝石等课程感兴趣，那就另当别论了。 6️⃣ 在100level或必修课程中，教授之间的差距可能不大，但具体还是要看往年的均分和分数区间来判断。 7️⃣ RMP和其他人给的教授评价，听听就好，主观性很强。没有人能上那么多教授的同一门课。 8️⃣ 如果不知道这门课讲什么，可以搜索课程名称+课程大纲来了解。 9️⃣ 在选课前一个小时上线，开始刷新并调整课程表。 🔟 同时打开两个网页，每个网页一个课程表，到点后刷新开始注册，具体流程可以参考之前的帖子。 1️⃣1️⃣ 如果不知道选哪门课或哪位教授，可以多选几门，不喜欢再换。9月16日前都可以自由更改（第一学期add/drop without W standing deadline）。 1️⃣2️⃣ Workday的选课时间是温哥华时间，不会换的可以搜索一下。 1️⃣3️⃣ 别为了强迫自己好好学习而选择早八的课程...想了解更多请加慈喀SEO百科小编QQ:853616368